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大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒實驗使用說明
發(fā)布時間:2025/4/24瀏覽:27次
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  以下是關(guān)于大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:

  BS-3471 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法:用純化的大鼠sLR抗體包被微孔板形成固相抗體,依次加入樣本、HRP標記的抗體,形成復合物后通過TMB顯色,顏色深度與樣本中sLR濃度正相關(guān)。

  二、試劑盒組成

  預包被微孔板?:含固相抗體

  標準品?:濃度梯度通常為80、40、20、10、5、2.5 U/L

  檢測抗體?:HRP標記的sLR抗體

  顯色底物?:TMB溶液

  終止液?:酸性溶液(如2M H?SO?)

  洗滌緩沖液?:PBS或TBS配方

  三、樣本處理要求

  樣本類型?:血清、血漿(肝素/EDTA抗凝)、組織勻漿液

  采集注意事項?:

  避免溶血,室溫血液凝固10-20分鐘后離心(2000-3000 rpm,20分鐘)

  長期保存需-20°C分裝,避免反復凍融

  稀釋建議?:通常按1:5~1:20稀釋,高濃度樣本需進一步稀釋

  四、實驗步驟

  加樣?:

  每孔加入50μL標準品或樣本,設(shè)雙復孔

  孵育?:37°C溫育1小時,洗滌3次

  酶標抗體結(jié)合?:加入HRP標記抗體,37°C孵育30分鐘

  顯色?:加入TMB底物避光反應15分鐘

  終止與檢測?:加終止液后15分鐘內(nèi)測450nm OD值

  五、注意事項

  質(zhì)量控制?:

  每板需設(shè)空白孔、標準曲線孔和質(zhì)控樣本

  標準曲線R2應≥0.99

  操作規(guī)范?:

  避免底物接觸金屬器械,終止液有腐蝕性需防護

  開封后未用完板條需密封干燥保存

  數(shù)據(jù)計算?:

  以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,用四參數(shù)擬合計算樣本濃度

  六、技術(shù)參數(shù)

  檢測范圍?:通常2.5-80 U/L

  靈敏度?:<1.0 U/L(不同品牌可能有差異)

  批內(nèi)/批間差?:CV<10%

  如需具體品牌(如天津本生、天正信達生物等)的差異說明,可進一步提供補充信息。

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